THP-1(人單核細(xì)胞)和RAW264.7(鼠巨噬細(xì)胞)是典型的難轉(zhuǎn)細(xì)胞,即便嘗試使用不同的轉(zhuǎn)染試劑,轉(zhuǎn)染效率還是不盡如人意。
NATE?是由InvivoGen專(zhuān)門(mén)推出的核酸轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑,用于提高免疫細(xì)胞的瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染效率,尤其適合THP-1和RAW 264.7細(xì)胞,只需在轉(zhuǎn)染步驟前添加NATE?孵育30分鐘,即可進(jìn)行后續(xù)轉(zhuǎn)染操作。
NATE? — Nucleic Acid Transfection Enhancer
在真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染期間,外源核酸(如質(zhì)粒DNA)的主要障礙是它們會(huì)被胞質(zhì)傳感器檢測(cè),如cGAS/STING,AIM2炎癥小體和LC3介導(dǎo)的自噬。這些防御性級(jí)聯(lián)信號(hào)的激活通常會(huì)導(dǎo)致低轉(zhuǎn)染效率、降低的細(xì)胞活力和不一致的結(jié)果,尤其是在難轉(zhuǎn)細(xì)胞(如免疫細(xì)胞)的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中。NATE?抑制許多核酸感應(yīng)途徑,從而保護(hù)外源DNA并促進(jìn)其表達(dá)。
NATE?技術(shù)特點(diǎn)
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與常用的轉(zhuǎn)染試劑(如GeneXPlus,Lipofectamine?LTX和jetPRIME?),物理方法(電轉(zhuǎn))以及慢病毒轉(zhuǎn)染等兼容;
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更高的轉(zhuǎn)染效率,即使轉(zhuǎn)染大質(zhì)粒(> 10kb);
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在所有測(cè)試的轉(zhuǎn)染方案中對(duì)細(xì)胞溫和、無(wú)毒性。
NATE?是一種高純度(> 95%)的天然免疫系統(tǒng)抑制劑,并已在THP-1和RAW 264.7細(xì)胞的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行功能測(cè)試。
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RIG-I & cancer immunotherapy
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