以Fab片段為基礎(chǔ)的無痕親和細(xì)胞分選技術(shù)(traceless affinity cell selection, Fab-TACS),由IBA Lifesciences根據(jù)其獨家的Strep-tag?/Strep-Tactin?蛋白純化系統(tǒng)發(fā)展而來。Fab-TACS運用免疫親和層析的原理,利用細(xì)胞表面抗原分子CD marker與Fab片段的特異性結(jié)合來進(jìn)行捕捉及釋放目標(biāo)細(xì)胞。以不具磁性且可逆的試劑,取代一般具高親和力的完整抗體, 直接由全血或其他血液樣本來進(jìn)行溫和的標(biāo)準(zhǔn)化分選,因此能精準(zhǔn)的提供您不含標(biāo)記、未被活化的目標(biāo)細(xì)胞。
重點產(chǎn)品: Fab-TACS Gravity - 細(xì)胞分選重力柱
簡單幾個步驟,獲得高純度目標(biāo)細(xì)胞
Fab-TACS重力柱內(nèi)裝有經(jīng)Strep-Tactin?涂布的細(xì)胞級中型瓊脂糖珠(cell-grade agarose matrix),如此一來,含有Twin-Strep-tag?的Fab片段(Fab-Streps)能與瓊脂糖珠結(jié)合。將全血或血液樣本加入重力柱,此時目標(biāo)細(xì)胞會與Fab-Streps進(jìn)行特異性結(jié)合,非目標(biāo)細(xì)胞則會直接流出。隨后,清洗重力柱將多余的非目標(biāo)細(xì)胞或血液雜質(zhì)洗去。最后,加入生物素(biotin)中斷Fab-Streps與Strep-Tactin?間的結(jié)合,與此同時,低親和力的Fab-Streps也會從目標(biāo)細(xì)胞上解離,而您便能獲得不含標(biāo)記、幾近原始的目標(biāo)細(xì)胞來進(jìn)行后續(xù)的實驗。
分選表現(xiàn):
純度
使用Fab-TACS細(xì)胞分選重力柱分離全血中的CD3+及CD4+免疫細(xì)胞。細(xì)胞樣本以CD3-APC (OKT-3)或 CD4-PE (OKT-4) 抗體染色后,進(jìn)行流式分析,左右分別為分選前后的細(xì)胞群分布。死細(xì)胞以DAPI染色先行排除,并使用不同F(xiàn)SC/SSC信號來排除雙粘體和細(xì)胞碎片。結(jié)果顯示:即使直接處理全血,F(xiàn)ab-TACS科技仍能分離出高純度目標(biāo)細(xì)胞。
得率
以Fab-TACS細(xì)胞分選重力柱分離CD3+及CD4+細(xì)胞,圖中為五次獨立實驗的平均分選結(jié)果。Fab-TACS科技能穩(wěn)定的從全血中分選出多量的目標(biāo)細(xì)胞。
上圖中顯示五次獨立分選后細(xì)胞的存活率。Fab-TACS科技確保您能獲得高存活率且具免疫活性的細(xì)胞,讓后續(xù)實驗結(jié)果更準(zhǔn)確。
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6-6299-002內(nèi)含:
1. 兩支Fab-TACS Gravity Column,每柱最多可以處理15ml的全血
2. 任選一款Fab-Strep (CD3, CD4或CD8)
3. Buffer CI (10x)
4. Biotin Elution Buffer